Микротитровальный планшет поставляется предварительно покрытый антителом, специфичным к тренболону.
При наличии в пробе антиген тренболон конкурирует с меченным пероксидазой хрена тренболоном (меченный ферментом антиген) за ограниченное число сайтов антител на микротитровальном планшете. После этого микротитровальный планшет промывают и добавляют субстрат фермента.
После рекомендуемой инкубации при комнатной температуре колориметрическию реакцию останавливают путем добавления стоп раствора, что приводит к изменению цвета от синего к желтому.
Оптическая плотность считывается при длине волны 450 нм, причем интенсивность цвета обратно пропорциональна концентрации тренболона в стандарте или пробе.